- O ônibus novo gene (acima) é altamente específico para determinados neurônios no cérebro do rato, indicado pelo Fluoreszensfärbung verde nos corpos celulares e seus contrafortes. ferry gene convencional (abaixo) se reúne por outro lado, muitos tipos diferentes de células.
precisão apenas em certas células predeterminadas pode penetrar - primeiro teste bem sucedido
Um grupo de pesquisadores alemães conseguiu construir por "engenharia de proteínas" chamado um vírus não-infecciosa, que pode ter como alvo os genes em células de certos subtipos são transmitidos. Aqui, este gene de transporte não só é altamente seletiva, mas também muito versátil.Assim, somente pequenas mudanças são necessárias, a fim de usá-los para tais tipos diferentes de células, como células endoteliais, linfócitos, ou neurônios. Os pesquisadores do Instituto Paul Ehrlich (PEI) é relatado na edição atual da revista Nature Methods.
genes mutados, substituindo intacta - o objetivo da terapia gênica é claramente definida. Com vetores lentiviral, portadores de ácidos nucléicos a partir de um subconjunto de retrovírus, pode até contrabandear genes em células, até agora. A maioria dos grupos estão trabalhando com os vetores de genes, embora os genes transferidos muito eficiente, mas não pode distinguir entre diferentes tipos celulares. Você não é seletivo.
"Isso é porque os vírus que se adaptaram ao longo de milhões de anos, perfeitamente ao seu hospedeiro e utilização de receptores da célula de entrada que estão presentes em muitos Zellytpen", disse Klaus Cichutek, Presidente e Diretor da Divisão de Biotecnologia Médica Paul Ehrlich-Institut . Christian J. Buchholz, chefe do departamento de "produto de transferência de genes virais medicamento e seus funcionários e parceiros externos colaboração nacionais e europeias já se conseguiu alterar as proteínas de superfície do vírus do sarampo, para que possam ser incorporados em vetores lentiviral.
Para entrada de célula que eles usam em vez da natural proteínas celulares receptores específicos na superfície de tipos de células individuais. Na instalação das proteínas de revestimento do vírus do sarampo vetores lentiviral já tinha tentado outros grupos de trabalho. Mas só por "engenharia de proteínas" - ou seja, a redução específica de proteínas - este foi o PEI-cientistas. Em uma segunda etapa, os pesquisadores modificaram uma das duas proteínas de superfície - proteína hemaglutinina - para que ele não pode se ligar ao receptor que está presente em muitas células humanas. Como é feito de espaços em branco chaves com pontos roteados da chave certa para uma fechadura, em seguida, converter Buchholz e empregados, anexando ao anticorpo pequenos fragmentos de seu "branco" ferries à precisão. Os fragmentos de anticorpos caber marcadores característicos em subpopulações de células como a chave na fechadura.
Teste com o gene de fluorescência
Para verificar a transferência, se ele realmente definido genes nas células, podem ser construídas, os cientistas de um gene para a proteína verde fluorescente. As fluorescentes, elas demonstraram que os genes são realmente transferidos exclusivamente para o tipo de célula desejada. Este resultado foi conseguido em culturas de células e in vivo após a injeção de pequenas quantidades dos vetores de genes para o sistema nervoso central de camundongos. "Nós temos o vetor fornecido com uma espécie de código de endereço que diz para ele ser transferido para o tipo de célula do corpo do gene", disse Buchholz, acrescentando: "Nós nos encontramos com os vetores previamente desenvolvido a partir de uma ampla gama de tipos de células relevantes no corpo, vir para terapias genéticas muito diferentes em questão. " Poderia usar a célula-tronco do sangue do vetor específico de um dia, consumindo extração, purificação e cultivo de células de sangue de pacientes que receberam terapia de gene a ser desnecessária.
No entanto, não só para o desenvolvimento da terapia de gene-alvo é o ferry gene, que levou os pesquisadores PEI para patentear uma ferramenta valiosa, "Mesmo na pesquisa básica, o vetor pode ser usado para estudar, por exemplo, no cérebro para atingir a função dos subtipos de neurônios individuais ", afirma Buchholz. Que isso é possível com o ônibus novo gene, os cientistas já demonstraram. "Nós refinamos o sistema tanto que até mesmo genes altamente específicas podem ser transmitidos em muito subtipos específicos de neurônios", explica o biotecnólogo. Com seu método, os pesquisadores transferiram o gene fluorescente seletivo do subtipo D-glutamato neurônios receptor-positivo. Neurobiologia Um grupo de trabalho da Universidade de Heidelberg já usa o vetor para suas pesquisas e outros manifestaram interesse
Comentários
Postar um comentário